高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。它由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。
工作時(shí)儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵壓入檢測(cè)系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入色譜系統(tǒng)，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，在其通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，被轉(zhuǎn)換成信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式輸出。
高效液相色譜儀的柱壓是否穩(wěn)定與色譜圖峰形好壞、分離效果、保留時(shí)間等有著密切關(guān)聯(lián)。以下是常見(jiàn)的幾種柱壓?jiǎn)栴}及解決方法：
(1)柱壓升高
①色譜柱被堵塞，解決方法更換新的色譜柱；
②系統(tǒng)壓力零點(diǎn)飄移，解決方法:調(diào)節(jié)壓力傳感器的零點(diǎn)；
③阻尼器堵塞，解決方法:拆下后進(jìn)行超聲波清洗或更換新的阻尼器；
④進(jìn)樣器、管路或連接口堵塞，解決方法:參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行清洗。
(2)柱壓降低:
①無(wú)流動(dòng)相流出，解決方法:檢查貯液瓶中有無(wú)流動(dòng)相、沉子是否浸沒(méi)在流動(dòng)相中、泵是否運(yùn)行；
②系統(tǒng)存在漏液，解決方法:檢查各部件的連接點(diǎn)，進(jìn)行再次固定；
③參比閥未關(guān)閉，解決方法將流速降低后關(guān)閉參比閥。
(3)柱壓不穩(wěn)
①系統(tǒng)管路中存在氣泡，解決方法重新進(jìn)行排氣操作；
②沉子表面的小孔被堵，解決方法:將沉子取下后進(jìn)行超聲波清洗。
